PCR作為一種分子生物學(xué)技術(shù)，用于放大特定的DNA片段，可看作生物體外的特殊DNA復(fù)制。通過DNA基因追蹤系統(tǒng)，能迅速掌握患者體內(nèi)的病毒含量，其精確度高達(dá)納米級別。作為這種醫(yī)學(xué)技術(shù)順利開展提供物理空間和室內(nèi)環(huán)境安全的PCR實(shí)驗(yàn)室，各醫(yī)院在進(jìn)行建設(shè)工作中，面臨不知如何選址、區(qū)域怎么劃分更合理潔污分離、空氣組織更利于保證凈化指標(biāo)、院感管理實(shí)行怎樣的措施更為安全等諸多問題。
一、選址
PCR實(shí)驗(yàn)室應(yīng)相對獨(dú)立，盡量避免與其他普通實(shí)驗(yàn)套疊或者有通道上的交叉。我們看過一個(gè)圖，他們的PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)置在檢驗(yàn)科的最里面，醫(yī)廢和標(biāo)本的運(yùn)送要穿過檢驗(yàn)科的整個(gè)走廊，這種情況人流、物流、污物均在同一個(gè)通道，交叉感染風(fēng)險(xiǎn)較高，應(yīng)盡量避免。
二、設(shè)置區(qū)域
PCR實(shí)驗(yàn)室應(yīng)設(shè)置以下區(qū)域：試劑儲存和準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。這個(gè)4個(gè)區(qū)域在物理空間上必須完全獨(dú)立，各區(qū)域無論是空間上還是在使用中，應(yīng)當(dāng)始終處于完全的分割狀態(tài)，不能有空氣的直接相通。根據(jù)使用儀器的功能，區(qū)域可以適當(dāng)合并。每個(gè)區(qū)域間設(shè)置傳遞窗，要求一側(cè)打開時(shí)另一側(cè)無法打開。4個(gè)區(qū)域應(yīng)設(shè)置獨(dú)立的緩沖間，應(yīng)設(shè)置可以通到四個(gè)操作區(qū)域的PCR走廊，在進(jìn)入各區(qū)域前，應(yīng)設(shè)置更衣間，每個(gè)區(qū)域的衣服可用不同顏色進(jìn)行區(qū)分，在清潔區(qū)應(yīng)設(shè)置洗澡間、衛(wèi)生間、值班室。還應(yīng)考慮到醫(yī)廢和標(biāo)本的運(yùn)送通道。
三、空氣流向
PCR實(shí)驗(yàn)室并沒有嚴(yán)格的凈化要求，但是為了避免各個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)域間交叉感染的可能性，通風(fēng)方式應(yīng)為機(jī)械通風(fēng)，不應(yīng)自然通風(fēng)，且不宜使用循環(huán)風(fēng)。同時(shí)要嚴(yán)格控制送、排風(fēng)比例以保證各試驗(yàn)區(qū)的壓力要求。PCR實(shí)驗(yàn)室的空氣流向應(yīng)按照試劑儲存和準(zhǔn)備區(qū)→標(biāo)本制備區(qū)→擴(kuò)增區(qū)→擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)進(jìn)行，防止擴(kuò)增的產(chǎn)物順空氣氣流進(jìn)入擴(kuò)增前的區(qū)域。可選擇負(fù)壓排風(fēng)裝置，核心區(qū)域相對于相鄰區(qū)域最小壓不小于-10Pa。也可通過安裝排氣扇或者其他方式實(shí)現(xiàn)。PCR實(shí)驗(yàn)室要求溫度18~26℃，相對濕度30%~70%。
四、院感管理
1.進(jìn)入各工作區(qū)域應(yīng)當(dāng)按照單一方向進(jìn)行，即試劑儲存和準(zhǔn)備區(qū)→標(biāo)本制備區(qū)→擴(kuò)增區(qū)→擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。
2.各區(qū)域的設(shè)備、清潔用具標(biāo)記明確，不得混用。
3.各區(qū)域的衣服用不同顏色標(biāo)記，離開各區(qū)域時(shí)不得將工作服帶出。
4.試驗(yàn)臺用移動(dòng)式紫外線燈消毒，高度60-90cm。擴(kuò)增區(qū)延長照射時(shí)間，最好是過夜照射。同時(shí)各區(qū)域還需安裝懸掛式紫外線燈管。
5.各試驗(yàn)區(qū)盡量避免不必要的走動(dòng)和進(jìn)出，減少交叉感染風(fēng)險(xiǎn)。
6.擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)可能會用到某些可致基因突變和有毒物質(zhì)，應(yīng)特別注意實(shí)驗(yàn)人員的安全防護(hù)。
7.試劑儲存和準(zhǔn)備區(qū)：本區(qū)域?qū)毫]有明確要求，儲存試劑和用于標(biāo)本制作的消耗品等材料應(yīng)當(dāng)直接運(yùn)送至該區(qū)，不得經(jīng)過其他區(qū)域；試劑盒中的陽性對照品及質(zhì)控品不應(yīng)當(dāng)保存在該區(qū)，應(yīng)保存在標(biāo)本處理區(qū)。
8.標(biāo)本制備區(qū)：相對于臨近區(qū)域應(yīng)為正壓，以避免臨近區(qū)域進(jìn)入本區(qū)的氣溶膠污染。
9.擴(kuò)增區(qū)：相對于臨近區(qū)應(yīng)為負(fù)壓，為避免氣溶膠所致的污染，應(yīng)當(dāng)盡量減少在本區(qū)域內(nèi)的走動(dòng)。必須注意的是，所有經(jīng)過檢測的反應(yīng)管不得在此區(qū)域打開。
10.擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)：相對于臨近區(qū)域應(yīng)為負(fù)壓。本區(qū)域是最主要的擴(kuò)增產(chǎn)物來源，因此必須注意避免通過本區(qū)域扥物品帶出。廢液必須收集至1mol/L的HCl中，并且不能在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)傾倒，而應(yīng)在遠(yuǎn)離實(shí)驗(yàn)室的地方倒掉。用過的吸頭也必須放至1mol/L的HCl中浸泡后再放到垃圾袋中按程序處理，如焚燒等。本區(qū)域需要配置高壓滅菌鍋用以滅活擴(kuò)增后的標(biāo)本。
一些醫(yī)院的設(shè)計(jì)稿基本都是這個(gè)樣子。這個(gè)布局在院感上明顯的不符合“三區(qū)兩通道”的要求：只有污染區(qū)（四個(gè)操作間）、潛在污染區(qū)（PCR走廊）、沒有清潔區(qū)（洗澡間、值班室），沒有醫(yī)廢通道和標(biāo)本運(yùn)送通道，沒有更衣間來穿戴防護(hù)用品，穿脫防護(hù)用品、可復(fù)用防護(hù)用品的浸泡、清潔用具存放均在狹小的緩沖間進(jìn)行。未考慮到感控的部分流程。因此，建議各醫(yī)院設(shè)計(jì)PCR實(shí)驗(yàn)室時(shí)還是需要感控專職人員提前介入，以免建好之后再改建，延長工期、浪費(fèi)財(cái)力。
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