PCR實驗室又稱基因擴增實驗室，是分子診斷的基礎(chǔ)，也是進行PCR實驗的必備場所。近年來因分子診斷領(lǐng)域的不斷發(fā)展，如何規(guī)劃一個合格的實驗室是每一個pcr從業(yè)者首先要遇到的問題。
1、如何才能設(shè)計一個合格的PCR實驗室呢，簡單的說就是：各區(qū)獨立，注意風(fēng)向，因地制宜，方便工作，同時也要注意標(biāo)本的接收問題。
首先我們來看各區(qū)獨立。其含義就是PCR實驗室的四個區(qū)域（如果使用實時熒光定量PCR，則只需要三個區(qū)，因為擴增和產(chǎn)物分析可以在同一個區(qū)域內(nèi)解決）即試劑準(zhǔn)備區(qū)，標(biāo)本制備區(qū)，擴增區(qū)和產(chǎn)物分析區(qū)，應(yīng)該在物理上完全分開的各自獨立的區(qū)域，并且不能有連接各個區(qū)域的中央空調(diào)等會導(dǎo)致空氣流通的情況。物品的傳遞應(yīng)采用高密封度的傳遞窗，一個合格的傳遞窗應(yīng)該是雙開門的結(jié)構(gòu)，當(dāng)一側(cè)打開時另外一側(cè)自鎖無法打開，且艙內(nèi)應(yīng)配套紫外燈消毒功能，這樣就可以高效避免交叉污染。
第二是注意風(fēng)向。由于PCR對原始靶核酸的擴增有一個指數(shù)級的增長，當(dāng)檢測有陽性后，假如在開放式的環(huán)境下，很容易就形成了所謂的“氣溶膠污染”，為了防止這種污染的發(fā)生，就需要注意各實驗室區(qū)域內(nèi)的氣流。一般來說，實驗室的空氣流通采用正壓或者負(fù)壓，按照試劑準(zhǔn)備區(qū)→標(biāo)本制備區(qū)→擴增產(chǎn)物分析區(qū)方向空氣壓力遞減的方式進行通過壓差控制，使整個PCR實驗過程中試劑和標(biāo)本免受氣溶膠的污染，并且降低擴增產(chǎn)物對人員和環(huán)境的污染。
各個實驗室與非潔凈區(qū)之間的閘間保持正壓，＞10Pa，實驗與閘間之間的氣流組織方向為：試劑準(zhǔn)備區(qū)空氣流向閘間，標(biāo)本制備區(qū)流向閘間，而PCR擴增區(qū)氣流方向由閘間流向PCR擴增區(qū)，純化區(qū)同理；同時按照試劑單向流方向，各個實驗室之間設(shè)計不同壓力梯度來實現(xiàn)單向氣流組織方向，由試劑準(zhǔn)備區(qū)（+20Pa）、標(biāo)本制備區(qū)（+15Pa）、擴增反應(yīng)一區(qū)（-5Pa）、純化區(qū)（-10Pa）、擴增反應(yīng)二區(qū)（-20Pa）、到后純化區(qū)（-25Pa）壓力逐漸降低，形成單向負(fù)壓壓力梯度。
第三就是因地制宜。PCR實驗室不是千篇一律的，要分析具體的情況制定符合自己當(dāng)前的需求，合乎國家的標(biāo)準(zhǔn)即可，不必強求理想狀態(tài)。
最后是方便工作。PCR實驗室的建立離不開以人為本，在做到防止污染的情況下，應(yīng)最大限度地考慮在日常檢測工作時是否方便。實驗室的過道能否方便日后新設(shè)備的進出，人員工作服和工作鞋的換穿是否方便。
2、實驗室的區(qū)域規(guī)劃好之后，根據(jù)需求我們可以進駐一下主要的實驗用品及耗材。按照實驗室的需求放置試驗臺，天平、冰箱、低溫冰箱、離心機、洗眼器、加樣器、振蕩器、紫外燈、冰箱、生物安全柜(或潔凈工作臺、或者排風(fēng)柜排毒柜)、恒溫水浴、上下水設(shè)備、廢棄物容器、通風(fēng)排風(fēng)系統(tǒng)、水浴箱、核酸提取設(shè)備、實時熒光定量PCR儀等。
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